广泛使用的用于生产和纯化蛋白质的快速程序涉及添加
在此过程中，将肽标签与目标蛋白结合，将编码的DNA片段
目的蛋白将插入具有许多关键特征质粒的质粒中
包含复制起点，可让质粒在宿主大肠杆菌中复制
细胞中还含有赋予对阿拉伯IRA抵抗力的基因
携带质粒或多个克隆位点的细胞的选择提供了许多
限制性内切酶的位点切割PDU上的质粒Williams以消化质粒
例如，它会产生带有蛋白质编码区的DNA的血液末端
也可将其掺混入本实施例的上游质粒中
插入的DNA是三个片段，它们保留了来自多个克隆位点的CAG代码
氨基酸谷氨酰胺最多击中6次即可赎回代码，以将肽标签称为上游
还有另外两个密码子，其中一个是翻译起始位点ATG，它需要甲硫氨酸
较亮的一面是由于缺少：控制何时表达标签蛋白
细胞中的阻遏蛋白与蛋白质结合并形成RNA聚合酶的阻塞物
将一种诱导剂添加到培养基中，最终用户将其与阻遏蛋白结合
并允许RNA聚合酶通过并将DNA转录成RNA另一个重要
工程质粒中的区域是核糖体结合位点，核糖体结合到RNA的RNA上。
在找到第一个AUG起始密码子并将RNA转化为蛋白质之前，先将该位点定位
核糖体继续翻译，直到细胞转化为终止密码子为止
还原表达标签蛋白的质粒标签蛋白结合在细胞中
高达30％的细胞蛋白，其中许多此类细胞在培养物中大量生长
标签蛋白可以被生产下一步是收获细胞，将它们打破
并准备一个粗细胞提取物的柱子，该柱子包括所有与
很少的附加组件可以将标签蛋白与其中的其余细胞材料分离
蛋白质标签中的色谱柱历史对含镍镍具有亲和力并与之结合
所有的珠子都是蛋白质，像标签一样不粘手，可以洗掉
汽车的历史与完整蛋白质的分离是通过一个过程
通常称为亲和纯化返回的蛋白质从低pH的色谱柱中逸出
溶液导致病史残留物成为所需的蛋白质，并且无法与颈部结合
或在小珠上，或者用带有咪唑分子的溶液
在每种情况下，他的团队都会对北约进行绑定，标签蛋白在
标签蛋白从色谱柱中漏出，添加了酶以从
蛋白质的氨基末端同时添加另一种酶以修饰
标签末端的谷氨酰胺残基，这种修饰可防止
在他的研究中设计出了系统中使用的感兴趣的蛋白质，酶
在标签的作用中，标签可让您将酶保留在镍基上，而
感兴趣的蛋白质最终通过另一种酶洗涤，从而去除了修饰的谷氨酰胺
氨基酸，此酶可以稍后通过使用标签中的历史记录从混合物中去除
和镍基，将酶与目标蛋白分离，涉及的步骤
在生产和纯化目标蛋白质时可以相对较快地完成
在一个星期内