大家好 我是苏老师
欢迎大家参加职业药师继续教育的学习
我今天跟大家一起分享的内容是
国家规定的一些分析方法
一些定性定量的分析
方法与方法学验证
好 我们首先看看第一部分
国家规定的一些定性定量的分析方法
这里的分析方法我们主要指仪器分析
我们常用的 pH值测定
再就是气相 高效液相 薄层扫描
我们局限在这个范围
我们首先看pH值的方法
方法是三次测量法
所有的教材
不管是原来的还是现在的
都称为两次测量法
实际这是错的
好 我们来看看 为什么是错的
正确的应该是三次测量法
我们首先看看我们的电极系统
我们通常用的指示电极
毫无疑问 pH玻璃电极
参比电极是饱和甘汞电极
当然也可以是
二合一的复合pH玻璃电极
这是我们一个测量电池
我们看这边是一个玻璃电极
这是一个参比电极 饱和甘汞电极
这是我们的试样溶液
当我们用这两支电极
一支PH玻璃电极
另外一支饱和甘汞电极
浸入待测溶液 就构成了一个原电池
那么我们用电位差计
或者是PH计
因为PH计就是电位差计经过改造以后
而形成的一种测量仪器
电位差计经过改造就是pH计
那么原电池的电动势EMF
就等于正极减去负极
那么而现在饱和甘汞电极的电极电位
ϕSCE
负极把我们玻璃电极ϕ
玻璃电极电位再加上液接电位
然后我们合并同类项
就是当条件测定条件一定
饱和甘汞电极
在一定的温度下
测定条件一定时
毫无疑问电极电位是一个常数
同样我们玻璃电极
能斯特方程里面的截距k
可当我们的测定环境测定条件温度一定
它也恒为一个常数
同样液接单位也可以稳定到一个常数
好 我们括号里有三个常数
当然温度一定测量条件一定
这三个常数是一个定值
加上0.0592如果精确到小数点后
如果精确到我们的有效数字的4位
就是0.05916
这是我们电极的斜率
我们的自变量是溶液的PH值
我们观察这个方程
好像通过一次测量
就能够完成溶液PH值的测定
显然这不可能的
因为有好多未知的参量
你例如
我们这个k里面
包含了好多内容
有不对称电位
就是玻璃电极的k里面包含了好多电位
有不对称电位
另外我们电池电动势里面包含着液接电位
这些都是未知的数字
这都未知
因此我们由这个值
这个值除以0.0592就等于pH值
这不可能
因为电池电动势里面
包含着未知的一些数字在里面
好 不可能实现一次测量
来测定溶液的PH值
好 我们这里有个批句
由于不对称电位与液接电位未知
所以溶液的PH值
不可能通过一次测量来完成
那么两次行不行呢
第一次
所谓两次 我们用一个标准缓冲溶液
配置一个标准缓冲溶液
把两支电极 一支指示电极
一支饱和甘汞电极 参比电极
浸入pH已知的标准缓冲液里面
用仪器测量电池电动势
其电池电动势 令其为EMFs
这是第一次
第二次 我们再把同样的两支电极
浸入待测溶液
测电池电动势令其为EMFx
好 两式相减
我们就可以通过计算得到
溶液的pH值是多少
两次测量法 毫无疑问
我们存在两个问题
一 要通过计算
才能得到溶液的PH值是多少
麻烦 这是一种问题
第二种问题
两次生产法必须满足下面两个条件
一 测量仪器性能良好
二 两支电极性能优良
那么这两个条件能否满足
如果能够满足可以使用两次测量法
如果不能满足
必须使用三次测量法
也就是说现在我给你的两支电极
再给你一台仪器
你知道这两支电极是好的吗
性能优良吗
你知道这个仪器是好的吗
性能良好吗
显然你不知道
所以两次测量法
一 麻烦
二 必须同时满足两个条件
如果不能满足这两个条件
不能同时满足
显然两次测量法是不可能的
理论上可以实际不行
为了解决这两个问题
一 计算麻烦的问题
二 两次测量法必须满足两个条件
这两个问题
所以当把电位差计改造为pH计时
我们做了下面三点变化
第一 按每0.0592伏特转换为一个pH单位
二 我们仪器上装了一个定位旋钮
定位旋钮的作用
我们书上介绍说抵消不对称电位
实际远远不止
我们通过旋钮
定位旋钮
可以抵消这三个常数的代数和
抵消代数和
那么有了定位旋钮以后
抵消了后我们就可以避免计算的麻烦
你看我们这把代数物
这两个方程的代数和
相当于截距
电池电动势这个方程里面的
括号 这一部分相当于截距
我们用定位旋钮把截距给一个反向电压
把它补偿为零
这样就可以避免第一个毛病
计算的麻烦
进过这种改正
三 我们所使用的两支电极性能是否良好
以及仪器性能是否优良
我们要知道这个问题
因此就要增加一次
仪器与电极的检验步骤
增加一次
我们刚才是两次
增加一次毫无疑问就是三次了
好 我们看看我们的三次测量法
毫无疑问我们要两个
pH值不一样的标准缓冲溶液
要两个
好 第一次我们把两支电极浸入第一种
标准缓冲溶液里面
我们可以得到一个
用定位旋钮给一个反向电压
使3项代数之和为0以后
我们的仪器的示值可以调整到
就这个标准溶液的pH值
换一句话来说
对于第一种pH值已知的标准缓冲溶液
你比如说9.56
打个比方
那么我就通过定位旋钮
旋转这个定位旋钮
是仪器的示值刚好是9.56
如果是这样的话
那么三项的代数之和
就补偿到零
避免计算的麻烦
第二次把同样的两支电极浸入
第二种标准缓冲溶液中
就可验证这两支电极
以及测量仪器性能是否良好
如果我的仪器示值刚好等于
第二种标准溶液的pH值
毫无疑问两支电极和测量仪器
性能都十分优良
否则的话不是仪器有问题
就是电极有问题
这是我们常用的标准缓冲溶液
注意事项
一 标准缓冲溶液的PH值
应该跟待测溶液 pH值比较接近
其pH值的增量
应该小于等于正负三个pH单位
另外我们标准缓冲液的温度
最好跟我们待测溶液的温度一致
三 电极浸入溶液
必须有足够的平衡时间
就是浸入后不能立即读数
它需要有一定的平衡的时间
四 玻璃电极在使用以前
必须在水中浸泡24小时以上
大家注意
目的为了激活电极与稳定不对称电位
大家千万要注意了
实际上有五
因为我们任何一支玻璃电器的寿命
就是时间的函数
即使把我们的玻璃电极
买过来以后放一直不用
两年以后
一般这支玻璃电极已经报废了
所以大家注意
我们的玻璃电极最好是买一支用一支
不要有库存
现在我们看看我们的参比电极
参比电极的真正的作用是什么
真正的作用是一个良导体
你看这是我们测量仪器
这是我们玻璃电极
这是敏感膜的部分
这是我们的饱和甘汞电极
为什么在绝大多数的情况下
我们用的参比电极都是饱和甘汞电极
道理就在这里
实际上它是一个导体
你看看我们的电路
现在这支是指示电极 玻璃电极
把我们接到测量仪器的负极
甘汞电极作为饱和甘汞电极作为正极
接在测量仪的正极
好 这个玻璃电极的膜内电位
通过内道体系
馈于我们的测量仪器的负极
玻璃敏感膜 外膜电位
通过溶液导电
饱和甘汞电极作为一个导体
可以测量仪器的正极
外膜电位与内膜电位
就是我们玻璃电极的膜电位
膜电位的变化应该符合能斯特方程
这是我们玻璃电极的能斯特方程
玻璃电极就是膜电位的增量
或者它的变化
跟我们溶液的pH值
是符合能斯特方程的
大家说既然我的饱和甘汞电极
本身就是一个良导体
那我能不能用金丝铜丝银丝来替代
不可能
因为一旦我们把任何一种金属导体
浸入溶液就形成了一支电极
那么这支电极稳不稳定
电极电位 不能稳定
不能稳定就不能作为参比电极
所以我们的饱和甘汞电极在一定温度下
电极电位非常稳定
好 大家要清楚这个问题
另外我们饱和甘汞电极在使用的时候
一定要注意
把上面的帽子和下面的帽子一定拔掉
因为这为什么
这个地方是一个多孔陶瓷
允许管内的液体
微量的向待测溶液渗漏
以沟通电学回路
否则这就是开路
你看如果我这个地方
用玻璃管全部把它封死
玻璃把它封死
我们整个测量回路就是呈开路状态
这不可能
至少我们饱和甘汞电极的部分是潮湿的
是会能够导电的
为了保证管内液体微量向溶液泄漏
上面帽子下面帽子必须拔掉
因此在操作使用的时候
应该注意这个问题
如果是一只符合pH玻璃电极
在这个电极的上半部分
也有一个帽子
有一个塞子应该拔掉
维持一定的大气压力
好 这是关于溶液的pH值的测定方法
请大家注意了
不能采用两次测量法
绝对不能采用
否则的话测量误差很大
另外有5点注意事项
应该注意
好 我们再看看
第二个内容就是国家规定的
在我们色谱里面
常用的定性、定量的分析方法
首先我们看薄层的定性
那么定性的方法是我们国家规定
是应该将待定性的试样溶液
与对照品溶液
点在同一薄层上
然后去比较色谱斑点的颜色
与RF值的一致性
进行定性鉴别
这是我们一个实例
还有注明当时的温度是多少
空气的相对湿度是多少
定量
毫无疑问我们是
通常使用的薄层扫描
中式英文手写
薄层扫描TLCS
地道英文手写QTLC
叫原位定量薄层
这是基本原理部分
这个都不说了
简要的基本原理部分
刚才是定性薄层定性
国家规定的定性分析方法
定量
国家规定的定量分析方法是
随行标准 外标两点
8个字
所谓随行标准
就是把样品溶液与对照品溶液
点在同一块薄层板上
展开测定
这种方式就是所谓的随行标准
目的是为了克服板间误差
提高定量分析的准确度
外标两点就是配置
高低两种不同浓度的对照品溶液
分别点在薄层板上 测定峰面积
这是我们一个示意图
我们通常是取22乘20一块薄层板
我现在令CS1cs1
为低浓度的对照品溶液
或者标准品溶液
CS2CS2为高浓度的
对照品溶液 或者标准品溶液
Cx cx cx cx为试样溶液
我们可以看通过这个示意图可以看到
每种浓度的标准品溶液
必须点两个斑点
试样必须点4个斑点
而且是交叉点样
这是国家的规定
然后我们沿这个通道进行扫描
色谱通道进行扫描
这就是我们随行标准 外标两点
分析方法原理示意图
两点定一直线
而具体的操作
应该是按照这种操作方法
否则不行
这是我们通常用的仪器 测量仪器
定性分析的方法跟气相色谱一样
定量可以用外标法
我们大家可以讨论一下
我们对于一般的成分
高效液相色谱 可以使用外标法
一般的成分
就是中药里面一般的成分
不是剧毒成分
为什么可以使用外标法
我们气相色谱
为什么不能使用外标法
外标法我们通常用的都是比较法
不是标准曲线法
就是外标一点法
为什么可以用
那么毫无疑问
很大的原因 它有定量环
我们可以精确的进样
没有进样误差
那么气相色谱没有定量环
进样误差就很大
主要原因在这里
另外内标法
化学药品或者含有聚毒成分的中药
必须使用内标法
或者内标比标准出现法
实施定量
这是国家的规定
一般成分
就是没有毒性的中药成分
我们可以使用外标法
所有化学物品
以及含有剧毒成分的中药
必须使用内标
或者内标比标准出现法
否则不行
好 第二部分的内容
分析方法的验证
又叫我们分析方法的效能指标
最早这种说法
我们通过一些下面的实验
我们来考察评价
我们分析方法是否准确可靠
合理可行
因此我们验证的内容有
准确度的测量
就准确度的验证 简单
精密度怎么样
专属性检测线是多少
定量线是多少
线性范围及范围
范围有多大
线性好不好
以及一些耐用性质量
来评价一个方法是否准确可靠
合理可行
大家休息10分钟